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免疫組化試劑盒是一種用于生物樣本分析的工具

更新時(shí)間:2025-10-07   點(diǎn)擊次數(shù):111次
  免疫組化試劑盒是一種用于生物樣本分析的工具,常用于檢測(cè)特定抗原或蛋白質(zhì)在組織或細(xì)胞中的分布和表達(dá)。通過使用這種試劑盒,可以在組織切片或細(xì)胞涂片中標(biāo)記出目標(biāo)分子,從而幫助科學(xué)家、醫(yī)生和研究人員了解疾病的機(jī)制、診斷病理、或研究特定生物標(biāo)志物。
  基本原理:
  免疫組化技術(shù)通過抗原-抗體反應(yīng)來進(jìn)行檢測(cè)。該試劑盒通常包含抗體、顯色劑、抗原修復(fù)液、封閉液等。具體操作是將目標(biāo)抗體(針對(duì)特定蛋白質(zhì)或抗原)與樣本中的抗原結(jié)合,并通過某種顯色反應(yīng)使目標(biāo)位置顯現(xiàn)出來,最終通過顯微鏡觀察結(jié)果。
  常見應(yīng)用:
  病理診斷:通過免疫組化分析,病理學(xué)家可以識(shí)別癌癥或其他疾病相關(guān)的生物標(biāo)志物。
  細(xì)胞研究:檢測(cè)特定蛋白在細(xì)胞內(nèi)的分布。
  臨床研究:幫助了解不同疾病狀態(tài)下的分子機(jī)制。
  免疫組化試劑盒的使用方法
  1.切片,烤片60℃1h。
  2.脫蠟及復(fù)水。
  3.PBS浸洗3次,每次3min。
  4.抗原修復(fù)。(一般來說,常見的修復(fù)方式有:EDTA、檸檬酸、蛋白酶K,可根據(jù)一抗進(jìn)行選擇。)
  5.PBS浸洗3次,每次3min。
  6.30%H2O2(1000μlPBS+200μl30%H2O2)室溫避光孵育15min。
  7.PBS浸洗3次,每次3min。
  8.加適量山羊血清封閉15min,覆蓋住樣本即可。
  9.滴加一抗,4℃過夜孵育。
  10.PBS浸洗3次,每次3min。
  11.滴加抗小鼠生物素化二抗(使用濃度為1:100-1:300),37℃孵育1h。
  12.PBS浸洗3次,每次3min。
  13.滴加HRP標(biāo)記鏈霉親和素三抗(使用濃度為1:100-1:300),室溫孵育30min。
  14.PBS浸洗3次,每次3min。
  15.DAB顯色5min。(900μlPBS+50μl20xDAB顯色液A+50μl20xDAB顯色液B)
  16.蒸餾水浸洗。
  17.蘇木素復(fù)染2-3min。
  18.用1%的鹽酸酒精分化數(shù)秒,自來水返藍(lán)。
  19.脫水透明。
  20.中性樹膠封片。
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